總膽固醇(TC)含量測(cè)定試劑盒 微量法
測(cè)定意義:血清TC是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和??偰懝檀及ㄓ坞x膽固醇和膽固醇酯。肝臟是TC合成和貯存的主要器官。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料,也是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分,其血清濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。臨床上將血總膽固醇增高稱為高膽固醇血癥。
測(cè)定原理:酯酶催化膽固醇酯作用下水解成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),F(xiàn)C在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,經(jīng)過(guò)氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物,其顏色深淺與TC含量成正比。
總膽固醇(TC)含量測(cè)定試劑盒 微量法
注意:正式測(cè)定之前選擇2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào):BC1985
規(guī)格:100 管/96 樣
購(gòu)買(mǎi)鏈接:BC1985 產(chǎn)品規(guī)格檢索 (labgogo.com)
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:異丙醇100mL(自備)。
TC 工作液:液體20mL×1 瓶,4℃保存。
TC 標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 支,0.5μmol/mL,4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明: TC 包括游離膽固醇和膽固醇酯。TC 是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。利用酯酶催 化膽固醇酯水解生成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步 利用膽固醇氧化酶催化FC 氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;后利用過(guò)氧化物酶催化H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm 有特征吸收峰,其顏色深淺與TC 含量成正 比。 自備儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96 孔板。
操作步驟:
一、TC 的提?。?/span>
1、 組織中TC 的提取:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g4℃離心10min,取上清,即TC待測(cè)液。
2、 細(xì)胞、細(xì)菌中TC 的提取:先收集400-500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,加1mL試劑一, 超聲波破碎1min(強(qiáng)度20%,超聲2s,停1s),8000g4℃離心10min,取上清,即TC 待測(cè)液。
3、 血清(漿)等樣品:直接測(cè)定。
二、測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到500nm,蒸餾水調(diào)零。
2. TC 工作液置于37℃水浴30min。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 標(biāo)準(zhǔn)品和150μLTC 工作液,混勻,靜置24h 后 于500nm 處比色,記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。
4. 測(cè)定管:在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 待測(cè)液和150μLTC 工作液,混勻,靜置24h后 于500nm 處比色,記為A 測(cè)定管。
注意:標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
相關(guān)文獻(xiàn):
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